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722型分光光度計的使用方法

更新時間:2018-04-16點擊次數:13944
一、 丈量原理 
  分光光度法丈量的理論依據是伯郎—比耳定律:當容液中的物質在光的照射和激發下,產生了對光吸收的效應。但物質對光的吸收是有選擇性的,各種不同的物質都有其各自的吸收光譜。所以根據定律當一束單色光通過一定濃度范圍的稀有色溶液時,溶液對光的吸收程度A與溶液的濃度c(g/l)或液層厚度b(cm)成正比。其定律表達式A=abc 
  (a是比例系數)。當c的單位為mol/l時,比例系數用ε表示,則A=εbc稱為摩爾吸光系數。其單位為L·mol-1·cm-1它是有色物質在一定波長下的特征常數。 
  T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或 A=K·C·L(比色皿的厚度) 
測定時,進射光I, 吸光系數和溶液的光徑長度不變時,透過光是根據溶液的濃度而變化的,即“K”為常數。比色皿厚度一定,“L”、“I0”也一定。只要測出A即可算出“C”。 
《分光光度計的表頭上,一行是透光率,一行是吸光度。》 
二、 722型分光光度計的使用 
  1、將靈敏度旋鈕調至“1”檔(信號放大倍率zui小)。 
  2、開啟電源,指示燈亮 ,選擇開關置于“T”,波長調至到測試用波長。儀器預熱20分鐘。 
  3、打開試樣室(光門自動封閉),調節透光率零點旋鈕,使數字顯示為000.0。(調節100%T旋鈕),蓋上試樣室蓋,將比色皿 
架處于蒸餾水校正位置,使光電管受光,調節透光率100%旋鈕使數字顯示100.0。如顯示不到100.0,則可適當增加微電放逐大的倍數。(增加靈敏度 
的檔數同時應重復(3)調節儀器透光率的“0”位)但盡量使倍率置于低檔使用。這樣儀器會有更高的穩定性。 
  4、預熱后,按(3)連續幾次調整透光率的“0”位和“100%”的位置,待穩定后儀器可進行測定工作。 
三、 吸光度“A”的丈量 
 將選擇開關置于A 。調節吸光度調零旋鈕,使得數字顯示為零,然后將被測樣品移進光路,顯示值即為被測樣品的吸光度值。 
四、 濃度c的丈量 
將選擇開關由“A”旋至“C”將已標定濃度的樣品放進光路,調節濃度旋鈕,使得數字顯示為標定值,將被測樣品放進光路即可讀出被測樣品的濃度值。 
留意事項: 
1、丈量完畢,速將暗盒蓋打開,封閉電源開關,將靈敏度旋鈕調至zui低檔,取出比色皿,將裝有硅膠的干燥劑袋放進暗盒內,關上蓋子,將比色皿中的溶液倒進燒杯中,用蒸餾水洗凈后放回比色皿盒內。 
2、每臺儀器所配套的比色皿不可與其它儀器上的表面皿單個調換。 
使用方法 
  (1)預熱儀器 將選擇開關置于“T”,打開電源開關,使儀器預熱20分鐘。為了防止光電管疲憊,不要連續光照,預熱儀器時和不測定時應將試樣室蓋打開,使光路切斷。 
  (2)選定波長 根據實驗要求,轉動波長手輪,調至所需要的單色波長。 
 (3)固定靈敏度檔 在能使空缺溶液很好地調到“100%”的情況下,盡可能采用靈敏度較低的擋,使用時,首先調到“1”擋,靈敏度不夠時再逐漸升高。但換擋改變靈敏度后,須重新校正“0%”和“100%”。選好的靈敏度,實驗過程中不要再變動。 
  (4)調節T=0% 輕輕旋動“0%”旋鈕,使數字顯示為“00.0”,(此時試樣室是打開的)。 
  (5)調節T=100% 將盛蒸餾水(或空缺溶液,或純溶劑)的比色皿放進比色皿座架中的*格內,并對準光路,把試樣室蓋子輕輕蓋上,調節透過率“100%”旋鈕,使數字顯示正好為“100.0”。 
  (6)吸光度的測定 將選擇開關置于“A”,蓋上試樣室蓋子,將空缺液置于光路中,調節吸光度調節旋鈕,使數字顯示為“.000”。將盛有待測溶液的比色皿放進比色皿座架中的其它格內,蓋上試樣室蓋,輕輕拉動試樣架拉手,使待測溶液進進光路,此時數字顯示值即為該待測溶液的吸光度值。讀數后,打開試樣室蓋,切斷光路。 
  重復上述測定操縱1-2次,讀取相應的吸光度值,取均勻值。 
  (7)濃度的測定 選擇開關由“A”旋置“C”,將已標定濃度的樣品放進光路,調節濃度旋鈕,使得數字顯示為標定值,將被測樣品放進光路,此時數字顯示值即為該待測溶液的濃度值。 
  (8)關機 實驗完畢,切斷電源,將比色皿取出洗凈,并將比色皿座架用軟紙擦凈。
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